De : https://sashalatypova.substack.com/p/vials-of-pfizer-and-moderna-are-contaminated?

Les flacons de Pfizer et Moderna sont contaminés par de gros fragments d'ARN et des gènes résistants aux antibiotiques pour la kanamycine et la néomycine

Les résultats de séquençage des flacons Pfizer et Moderna ont été rapportés - voir le post lié

Sasha Latypova 16 févier 2023

Le séquençage du contenu de plusieurs flacons Moderna et Pfizer a été publié dans cet excellent article. Il contient une description technique détaillée des méthodes utilisées. Je ne suis pas un expert de ces techniques, mais la personne qui a fait cette analyse est un expert ayant accès au matériel et aux outils nécessaires :

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Introduction As universities in the United States continue to mandate liability-free injections (COVID vaccines) for students at limited risk of contracting COVID, it becomes imperative that more public information be made available for the ingredients of these experimental vaccines. Both the…Introduction Alors que les universités aux États-Unis continuent d'imposer des injections sans responsabilité (vaccins COVID) pour les étudiants à risque limité de contracter le COVID, il devient impératif que davantage d'informations publiques soient mises à disposition sur les ingrédients de ces vaccins expérimentaux. Les deux…

Les impuretés génétiques de l'ARNm restent un problème non résolu :

Plusieurs autres auteurs et moi-même avons discuté du fait qu'il semble impossible de fabriquer ces produits selon les normes actuelles des bonnes pratiques de fabrication (cGMP). Plus précisément, le problème de l'instabilité de l'ARNm n'a jamais été résolu. L'ARNm, en particulier les grandes séquences, est fragile et instable et se brise pendant la fabrication et l'administration, ce qui entraîne une fragmentation aléatoire qui est considérée comme une impureté génétique - un contaminant qui peut présenter un risque important de production de protéines aberrantes inconnues ou d'autres dommages à la machinerie cellulaire ou génétique. Il convient de noter que la production d'une protéine spécifique définie avec précision de manière reproductible n'a JAMAIS été démontrée avec ces injections. Lorsque j'ai signalé cela, j'utilisais des informations provenant de documents EMA divulgués à partir de la fin de 2020.

Due Diligence and ArtDiligence raisonnable et art

Broken BioweaponArme biologique brisée

Background: Lack of mRNA integrity and product impurities (fragmented nucleic acid chains) were found in Pfizer’s product days before it was authorized for market. mRNA integrity, and conversely, its instability, is one of the most important variables relevant to all mRNA vaccines. Pfizer and BioNTech repeatedly stated that the efficacy of the product …

Contexte : Un manque d'intégrité de l'ARNm et des impuretés du produit (chaînes d'acide nucléique fragmentées) ont été découverts dans le produit de Pfizer quelques jours avant son autorisation de mise sur le marché. L'intégrité de l'ARNm, et inversement, son instabilité, est l'une des variables les plus importantes concernant tous les vaccins à ARNm. Pfizer et BioNTech ont déclaré à plusieurs reprises que l'efficacité du produit…

Des bactéries résistantes aux antibiotiques introduites dans votre microbiome par Pfizer et Moderna :

La deuxième question très importante sur laquelle j'aimerais commenter concerne la résistance aux antibiotiques.

Les bactéries acquièrent une résistance aux antibiotiques par deux voies principales : la mutation chromosomique et l'acquisition d'éléments génétiques mobiles tels que plasmidsles transfert horizontal de gènes. Chaque année, de plus en plus de personnes meurent d'infections résistantes aux antibiotiques, et des prévisions récentes estiment que d'ici 2050, les bactéries résistantes aux antibiotiques tueront plus de personnes que le cancer . Les infections bactériennes sont dangereuses pour les personnes dont le système immunitaire est affaibli. En particulier, dans les unités de soins intensifs, la résistance aux antibiotiques affecte jusqu'à 50 % des patients critiques, doublant leur risque de mortalité.

Un plasmide est une petite molécule d'ADN extrachromosomique à l'intérieur d'une cellule qui est physiquement séparée de l'ADN chromosomique et peut se répliquer indépendamment. On les trouve le plus souvent sous forme de petites molécules d'ADN circulaires à double brin dans les bactéries. Dans la nature, les plasmides portent souvent des gènes qui profitent à la survie de l'organisme et confèrent un avantage sélectif tel que la résistance aux antibiotiques . Alors que les chromosomes sont gros et contiennent toutes les informations génétiques essentielles pour vivre dans des conditions normales, les plasmides sont généralement très petits et ne contiennent que des gènes supplémentaires qui peuvent être utiles dans certaines situations ou conditions. Les plasmides artificiels sont largement utilisés comme vecteurs dans le clonage moléculaire , servant à piloter la réplication de séquences d'ADN recombinant au sein d'organismes hôtes. En laboratoire, des plasmides peuvent être introduits dans une cellule par transformation Des plasmides synthétiques sont disponibles pour l'approvisionnement et peuvent être commandés auprès de divers fournisseurs.

La résistance aux antibiotiques est également un outil largement utilisé en biologie moléculaire. La transformation plasmidique en E. coliest un processus assez inefficace - seulement 1 cellule sur 10 000 en moyenne ! Sans aucun moyen de déterminer rapidement quelles cellules ont réussi à recevoir le bon plasmide, les scientifiques passeraient des heures, voire des jours, à essayer de trouver leurs bons clones. De plus, la présence d'un plasmide est désavantageuse du point de vue de la bactérie - une cellule contenant un plasmide doit répliquer le plasmide en plus de son propre ADN chromosomique, ce qui coûte des ressources supplémentaires pour maintenir le plasmide. L'ajout d'un gène de résistance aux antibiotiques au plasmide résout les deux problèmes à la fois– – il permet à un scientifique de détecter facilement les bactéries contenant des plasmides lorsque les cellules sont cultivées sur des milieux sélectifs, et fournit à ces bactéries une pression pour conserver votre plasmide.

Les biologistes moléculaires élaborent une résistance aux antibiotiques - qu'est-ce qui peut mal tourner ? Jusqu'à récemment, ce problème était à une échelle relativement petite.

Entrez dans la "révolution de l'ARNm":

Vous trouverez ci-dessous le tableau de la soumission de Pfizer à l'EMA décrivant le processus de fabrication de la substance médicamenteuse (ARNm lui-même qui est ensuite encapsulé dans des LNP). Notez à l'étape 1 "Modèle d'ADN linéaire" en tant qu'entrée de processus, il s'agit du modèle (semblable à un négatif photo) à partir duquel l'ARN sera transcrit. Cette matrice est fabriquée par le procédé commercial d'ADN plasmidique.

Il s'agit de la section des documents Pfizer EMA Chemistry Manufacturing and Control décrivant la matrice plasmidique (matériel de départ pour la fabrication d'ARNm) :

Contrôle des matériaux - Source, historique et génération de plasmides
Plasmide utilisé pour la production du modèle d'ADN linéaire
La fabrication de la substance médicamenteuse BNT162b2 est réalisée à l'aide d'une transcription in vitro qui comprend une matrice d'ADN linéaire comme matériau de départ. La matrice d'ADN linéaire est produite via l'ADN plasmidique à partir de cellules transformées d'Escherichia coli DH10B. Le plasmide, pST4-1525, est un plasmide de 7 824 paires de bases conçu pour la production de BNT162b2. Outre la séquence codant pour les régions transcrites, l'ADN plasmidique contient un promoteur de l'ARN polymérase T7, la séquence de reconnaissance de l'endonucléase utilisée pour la linéarisation, le gène de résistance à la kanamycine et une origine de réplication.
Carte plasmidique pST4-1525

Éléments fonctionnels de pST4-1525

Notez la deuxième ligne de ce tableau "Ce gène (aph(3')-II) code pour la résistance à la kanamycine aux cellules hôtes bactériennes utilisées pour la production de plasmide". La kanamycine est un antibiotique, le gène de résistance au plasmide est utilisé comme « marqueur » et pour augmenter les rendements de biofabrication.

Avec l'introduction de la fabrication d'ARNm à grande échelle, à raison d'un milliard de doses, il a été estimé que les entrées de matrice d'ADN doivent désormais être fabriquées en KILOGRAMMES .

Il y a environ un an, j'ai reçu un rapport d'un scientifique allemand qui a séparé l'ARN, l'ADN et les protéines des flacons Pfizer et Moderna. La teneur en ADN était incroyablement élevée, dépassant les seuils d'acceptation d'environ 100 à 200 fois.

Dans cette expérience, ni l'ADN ni l'ARN n'ont été séquencés, mais nous soupçonnions que l'ADN provenait d'une matrice d'ADN non traduite et d'impuretés du processus de fabrication qui n'avaient pas été correctement éliminées.

Voici la discussion à partir des résultats de séquençage du contenu des flacons Pfizer et Moderna. Nous pouvons maintenant confirmer que les gènes de résistance aux antibiotiques et autres contaminants sont nombreux dans ces injections :

L'EMA a fixé des limites pour la contamination par l'ADNdb à moins de 330ng/mg d'ARN. Cela représente environ 1 partie pour 3 030 molécules d'ARNm. On ne sait pas comment ils ont établi ces normes.

Remarque : l'EMA n'a pas établi ces normes. Pfizer leur a simplement dit que ce devraient être les normes et il n'y a pas eu de discussion sur la justification de cela.

Par exemple, un vaccin contenant 34 billions d'ARNm avec un taux de contamination de plasmide de 1 partie pour 3 000 équivaudrait à plus de 10 milliards de plasmides résistants aux antibiotiques doubles transfectés par patient. Les preuves de séquençage dont nous disposons maintenant confirment que la majeure partie de cet ADN est en fait l'ADN plasmidique d'expression, complet avec la protéine de pointe, les promoteurs d'expression de mammifère SV40, une double résistance aux antibiotiques et des origines de réplication à copie élevée compatibles avec les mammifères et les bactéries.
La contamination de l'ADN double brin (dsDNA) dans ces vaccins est une préoccupation importante. L'EMA a spécifié des limites d'ADNdb dans ces vaccins inférieures à 0,33 % (330 pg/mg). Cela représente environ 1 molécule d'ADN pour 3 000 molécules d'ARNm. Alors que les vaccins Moderna répondent à cette spécification, les vaccins Pfizer sont 10 fois plus contaminés avec 1 molécule d'ADN pour 350 ARNm. Il s'agit d'un plasmide compétent pour la réplication pour 350 molécules d'ARNm et équivaut à des milliards de plasmides résistants aux antibiotiques injectés par personne et par injection.

L'EMA avait de bonnes raisons de surveiller les niveaux d'ADNdb dans les vaccins. Les injections d'ADNdb peuvent induire des réponses d'interféron de type I via STING chez les mammifères. Si ces ADNdb sont emballés dans des LNP, ils peuvent transfecter et transformer des cellules mammifères et bactériennes dans le microbiome des patients. Il n'est pas clair comment l'EMA a statué sur leur contamination acceptable par l'ADNdb et si elle avait envisagé la contamination de l'ADN capable de s'amplifier à l'intérieur de l'hôte.
Les vecteurs contiennent des promoteurs de mammifères, des origines bactériennes de réplication en plus des gènes de résistance à la néomycine et à la kanamycine. Des plasmides circulaires comme celui-ci sont utilisés pour une transfection stable et une expression continue de gènes dans des cellules de mammifères avec le puissant promoteur SV40. Cela pourrait conduire à une expression de proteine de pointe prolongée chez les patients injectés avec ces constructions. Les bactéries transformées avec ces plasmides répliqueraient 50 à 300 copies du plasmide par cellule. On ne sait pas si les bactéries exprimeraient également la protéine de pointe dans ces plasmides, mais la présence de promoteurs T7 dans certains des vecteurs implique que cela est probable.
L'utilisation par les patients de néomycine ou de kanamycine après vaccination avec ces plasmides pourrait permettre la sélection de bactéries résistantes à la néomycine et à la kanamycine dans le microbiome intestinal. On ne sait pas si la protéine de pointe dans ces vecteurs d'expression est exprimée dans les bactéries. Néanmoins, l'inoculation à des milliards de personnes de plasmides à double résistance aux antibiotiques et à nombre élevé de copies pourrait constituer un pas en arrière dans notre lutte contre la résistance aux antibiotiques.